第一步，找到外泌体供体细胞；
第二步，找到那个药物；
第三步，把它装进去。
外泌体作为药物传递系统（drug delivery system ，DDS）靶向作用工具的潜力早已被发现了，而且基于外泌体的DDS已经有了值得期待的结果哦。
什么？外泌体不是整天兴瘤作浪，为癌作伥的吗？
外泌体：以前我没得选，现在我想做一个好外泌体。
下面进入正题，我们来看看怎么把“药物”装进外泌体。
1.当“药物”是microRNA时，看看Y.Akao et.al的一个有趣的实验：
第一步：将外周血淋巴细胞分离出来
第二步：分化，巨噬细胞贴壁
第三步：将目标RNA分子（此实验中为miR-143BPs）用脂质体转染的途径转染到单核/巨噬细胞中，此过程需12-16小时
第四步：移除上清液后在无血清培养基中孵化24小时（这时候细胞开始分泌携带miR-143BPs的外泌体了）
第五步：被选出来的MV/miR-143BPs和/或转染后的细胞重新输送回病人体内
该实验中，被静脉注射转染后细胞与外泌体的裸鼠肿瘤种植模型的血清、肿瘤、肾脏内miR-143水平显着升高。
2.当“药物”是siRNA时，L. Alvarez-Erviti et.al在nature biotechnology上的文章：
第一步：采集小鼠骨髓（造血祖细胞，成骨细胞等），用白介素加以刺激。
第二步：获得树突状细胞，导入编码Lamp2b与蛋白质靶的质粒。
第三步：取上清液，超速离心法提纯获得外泌体（其表面有能与目标受体特异性结合的配体）。
第四步：以电穿孔技术将siRNA转染外泌体
第五步：将外泌体重新注射回小鼠体内。
该实验中siRNA被递送到了大脑细胞内并关闭了同阿尔茨海默病有关的基因BACE1，结果显示，BACE1基因的活动能力降低了60%。
3.其他药物，因为种类较多，但方法都大同小异，此处只举例SuChul Jang et.al.的一个Doxorubicin（多柔比星）相关的实验：
第一步：获得U937（人单核细胞）或Raw264.7 (小鼠巨噬细胞)，在含有10% exosome-depleted FBS的RPMI培养基中孵育24小时
第二步：密度梯度超速离心法，提纯获得外泌体
第三步：加入Doxorubicin等药物，37℃孵育2小时。
第四步：将外泌体注射回生物体内。
该实验显示EVs会在结肠腺癌CT26细胞中富集，但同样也会在肝内富集。
下面是Tominaga N et al 对“封装”方式的一个总结：
不同的供体细胞和“药物”种类也会对封装有不同的要求，而且加工完毕的外泌体也未必就乖乖跑到目的地，看来要外泌体做些大好事儿也不容易啊！